미생물학 실험실에서 가장 필수적인 도구 중 하나는 멸균기이며, 오토 클레이브 (고압 증기 멸균기)가 가장 일반적으로 사용됩니다. GB 4789.1-2016에 따르면, 실험실 장비는 정기적으로 검사 및/또는 교정 (검사 태그 포함)을 유지하고 적절한 성능과 운영 안전을 보장하기 위해 서비스를 유지해야합니다. 그러나 Autoclave가 그러한 검사를 받았습니까? 그리고 확인을 수행하려면 어떻게해야합니까? 오늘, 우리는 오토 클레이브의 멸균 효능을 검증하는 주요 방법을 요약합니다.
오토 클레이브 멸균 효능의 검증에는 일반적으로 화학 지표, 최대 온도계, 자체 온도 튜브 및 생물학적 지표와 같은 방법이 포함됩니다. 이러한 방법은 유사한 원리를 공유하지만 멸균기가 멸균 중에 필요한 온도에 도달하는지 확인하는 경우 실험실의 특정 조건에 따라 하나 이상을 선택할 수 있습니다.
1. 화학 지표 방법
원리 : 화학 지표는 특정 온도와 시간 조건에서 색상 또는 모양 변화를 겪습니다. 이 변경은 멸균 매개 변수가 충족되었는지 여부를 결정하는 데 사용됩니다.
실험실에서 일반적으로 사용되는 품목은 3M 오토 클레이브 표시기 테이프로 멸균 후 색상이 변경됩니다. 이 테이프는 열 감성 화학 물질, 색상 개발자 및 페인트 재료로 만들어졌으며 접착제 테이프의 스트라이프 패턴으로 인쇄됩니다. 최소 길이는 5cm 인 멸균 패키지의 외부에 직접 적용됩니다. 테이프를 가볍게 눌러 우수한 접착력과 밀봉을 보장합니다. 121 ° C에 20 분 동안 또는 4 분 동안 130 ° C에 노출 된 후 테이프의 대각선 흰색 줄무늬가 완전히 검은 색으로 변해야합니다. 색상 변화가 고르지 않거나 불완전한 경우 패키지는 제대로 멸균되지 않은 것으로 간주됩니다.
2. 최대 온도계 방법
원리 :이 방법은 전통적인 의료 온도계와 유사하게 가열되면 더 낮은 온도로 돌아 가지 않는 수은 온도계를 사용합니다. 멸균 중에 도달 한 최대 온도를 나타냅니다.
검증하려면 수은 온도계를 물로 채워진 Erlenmeyer 플라스크 안에 넣으십시오. 멸균 동안 플라스크를 오토 클레이브의 상단 및 하단 부분에 놓습니다. 프로세스 후 온도계의 판독이 필요한 온도와 일치하는지 확인하십시오. 이 방법은 온도 만 확인할 수 있으며 멸균 시간 요구 사항이 충족되었는지 여부를 확인할 수 없으므로 자동 클레이브 검증의 최소 표준을 나타냅니다.
3. 자체 온도 튜브 방법
원리 :이 방법은 냉각 후 독특한 결정 형태로 특정 온도에서 녹고 재결정화되는 특정 화학 물질을 사용합니다. 이 화학 물질은 작은 유리 튜브에 밀봉되어 오토 클레이브 안에 배치됩니다. 멸균 후, 올바른 온도에 도달했는지 여부를 결정하기 위해 결정 모양을 검사합니다.
벤조산은 일반적으로 121-123 ° C의 융점으로 사용되며, 이는 오토 클레이브의 표준 멸균 온도와 정렬됩니다. 고체 벤조산은 작은 유리 튜브에 밀봉되어 오토 클레이브에 넣습니다. 멸균 후, 벤조산의 상태는 표적 온도가 달성되었는지 확인하는 것으로 관찰된다. 최대 온도계 방법과 마찬가지로이 접근법은 멸균 기간이 아니라 온도 만 검증합니다.
4. 생물학적 지표 방법
원리 :이 방법은 지표 유기체로서 Geobacillus Stearothermophilus의 비 병원성 포자를 사용하여 열 멸균의 효과를 평가합니다. 이 포자는 매우 강력하며, 병원성 클로스 트리 디움 보툴리눔 포자와 유사한 저항성이있어 멸균 효능을 검증하기에 적합한 지표가됩니다.
생물학적 지표는 포자 서스펜션, 포자 스트립 및 통합 포자 및 미디어 튜브의 세 가지 형태로 제공됩니다. 이들은 일반적으로 멸균 컨테이너의 5 개 위치, 즉 하단 층의 전면, 중간 및 뒷면과 상단 및 중간 층의 중심 지점에 배치됩니다. 멸균 후, 지표는 브로 모 크레솔 퍼플 글루코스-펩톤수에 접종하고 55-60 ℃에서 2-7 일 동안 배양된다. 매체가 맑고 변하지 않은 상태로 유지되면 포자가 사멸되어 멸균이 양호합니다. 배지가 노란색이고 탁도가되면 포자는 살아남아 멸균 성능이 좋지 않음을 나타냅니다. 포자 서스펜션과 포자 스트립 모두 동일한 검증 프로세스를 따릅니다.
상업용 생물학적 지표 튜브는 일반적으로 실험실에서 사용됩니다. 그들은 Geobacillus Stearothermophilus 포자와 성장 매체가있는 밀봉 된 유리 암페어를 포함합니다. 튜브는 멸균 용기 전체에 배치됩니다. 오토 클레이핑 후, 유리 암페어를 분쇄하여 매체를 방출하고, 튜브를 양성 대조군과 함께 56 ℃에서 배양한다. 멸균이 부적절하면 살아남은 포자가 자라서 국물을 노란색으로 돌릴 것입니다. 멸균이 효과적이면 포자가 비활성화되고 국물은 자주색으로 유지됩니다.
확인 빈도
현재, 오토 클레이브 효능 검증의 빈도와 관련하여 엄격한 국가 표준은 없습니다. 실험실은 자체 확인 일정을 설정하고 엄격하게 준수해야합니다. 결과의 편의성과 결과의 신뢰성을 고려할 때, 우리는 멸균 효과의 간단한 작동과 포괄적 인 검증을 제공하므로 생물학적 지표 튜브와 함께 지표 테이프를 사용하는 것이 좋습니다.
멸균에 대한 메모 (일부 수입 완전 자동 자동 클레이브에는 필요하지 않음)
고압 증기 멸균기를 사용하는 경우 증기가 풀릴 때 챔버 내부의 모든 차가운 공기를 배출하는 것이 중요합니다. 배기 밸브가 닫히면 모든 차가운 공기가 제거 된 후에야만. 공기가 남아 있으면 압력 게이지는 정확한 압력을 나타낼 수 있지만 챔버 내부의 실제 온도는 부족합니다. 공기가 많을수록 압력과 온도 사이의 불일치가 높아져 잠재적으로 불완전한 멸균이 발생합니다. (이것은 기포가 작은 가이드 튜브에 남아있는 발효 배지의 멸균 중에 종종 관찰됩니다.
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