오토 클레이브 멸균 효과 검증

미생물학 실험실의 필수 실험실 기기 중 하나는 멸균기이며, 오토 클레이브는 가장 일반적으로 사용되는 유형입니다. GB 4789.1-2016에 따르면, 실험실 장비는 정기적으로 검사 및/또는 교정 (적절한 라벨링 포함)을 유지하고 운영 성능과 안전을 보장하기 위해 서비스를 유지해야합니다. 그러나 멸균기가 비슷한 검사를 받습니까? 그러한 검증이 필요한 경우 어떻게 수행해야합니까?

오늘날, 우리는 autoclaves에 대한 멸균 효율성 검증의 주요 측면을 요약 할 것입니다.

오토 클레이브 멸균 효능을 검증하기위한 일반적인 방법에는 화학 지표 방법, 고정점 온도계 방법, 자체 온도 프로브 방법 및 생물학적 지표 방법이 포함됩니다. 이러한 방법의 원칙은 주로 멸균기 내부의 온도가 멸균 동안 필요한 수준에 도달하는지 여부를 확인하는 데 중점을 둡니다. 실험실의 특정 조건에 따라 유효성 검사를 위해 하나 또는 다중 방법을 선택할 수 있습니다.

1. 화학 지표 방법
원리 : 화학 지표는 특정 온도 및 기간에 노출 될 때 색상 변화 또는 변형을 겪으므로 멸균 매개 변수가 충족되었는지 여부를 평가할 수 있습니다.

실험실에서 일반적으로 사용되는 표시기는 3M 오토 클레이브 표시기 테이프로, 멸균 전후의 색상을 변경하여 효과를 나타냅니다. 이 테이프는 특수 접착 테이프에 줄무늬로 인쇄 된 열에 민감한 화학 물질과 색상 개발 제로 만들어집니다. 테이프는 패키지 외부에 최소 길이가 5cm 인 패키지 외부에 적용되어야하며 더 나은 접착력 및 밀봉을 위해 단단히 눌러야합니다. 121 ℃에서 20 분 동안 또는 4 분 동안 130 ℃에서 멸균 한 후, 테이프의 대각선 흰색 줄무늬는 완전히 검은 색으로 변합니다. 색상 변화가 고르지 않거나 불완전한 경우 패키지가 멸균 조건을 충족하지 못할 수 있습니다.

2. 고정 점 온도계 방법
원리 :이 방법은 전통적인 임상 온도계와 유사하게 도달 한 최고 온도를 유지하는 수은 온도계를 사용합니다. 멸균 동안 오토 클레이브 내부에서 달성 된 최대 온도를 결정하는 데 도움이됩니다.

검증을 위해, 수은 온도계는 물로 채워진 큰 원뿔형 플라스크 내부에 배치됩니다. 멸균 동안, 플라스크는 오토 클레이브의 상단 및 하단 섹션에 위치합니다. 멸균 후, 온도계 판독 값은 필요한 온도에 대해 검사됩니다. 그러나이 방법은 온도 만 검증되며 멸균 기간이 충분한 지 확인하지 않으므로 AutoClave 검증의 가장 기본적인 표준이됩니다.

3. 자체 온도 프로브 방법
원리 :이 방법은 열에 노출 될 때 특정 화학 물질의 용융 및 재결정 특성을 활용합니다. 이 화학 물질을 작은 유리 튜브 내부에 밀봉하여 오토 클레이브에 넣음으로써 멸균 후 결정 형성은 필요한 온도에 도달했는지 여부를 나타낼 수 있습니다.

일반적으로 사용되는 시약은 벤조산이며, 융점은 121-123 ° C이며 필요한 멸균 온도와 밀접하게 일치합니다. 멸균 동안, 고체 벤조산은 작은 유리 튜브에 밀봉되어 오토 클레이브 안에 배치된다. 공정 후, 벤조산의 결정 구조를 검사하여 필요한 온도가 달성되었는지 여부를 결정한다.

고정 점 온도계 방법과 마찬가지로,이 접근법은 온도를 나타내며 멸균 기간이 충분한 지 확인할 수 없습니다.

4. 생물학적 지표 방법
원리 :이 방법은 비 멸균 Geobacillus Stearothermophilus 포자를 지표 유기체로 사용하여 열 멸균의 효과를 평가합니다. 이 포자는 열에 강력하고 Clostridium Botulinum 포자와 유사한 열 저항성을 가지므로 자동 클레이브가 멸균 요구 사항을 충족하는지 여부를 평가하기위한 신뢰할 수있는 참조가됩니다.

생물학적 지표는 세 가지 형태로 제공됩니다.

포자 서스펜션
포자 스트립
배양 배지와 결합 된 포자 스트립 (생물 지표 튜브)
생물학적 지표는 일반적으로 멸균 챔버 내부의 5 개 위치에 배치됩니다.

더 낮은 레벨 : 전면, 중간 및 뒤로
상단 레벨 : 중심
멸균 후, 지표는 브로 모 크레솔 퍼플-글루코스 펩톤 물에 접종하고 55-60 ℃에서 2-7 일 동안 배양된다.

배양 배지가 명확하고 변하지 않은 상태로 유지되면 포자가 사멸되어 효과적인 멸균을 나타냅니다.
배지가 노란색으로 변하고 탁도가되면 포자가 살아 남았으므로 멸균 과정이 효과가 없음을 의미합니다.
동일한 검증 방법은 포자 서스펜션 및 포자 스트립에 모두 적용됩니다.

많은 실험실에서도 포자 서스펜션 및 스트립과 유사하게 작동하는 상업용 생물학적 지표 튜브를 사용합니다. 이 튜브에는 G. Stearothermophilus 포자와 함께 배양 배지의 유리 암페어가 포함되어 있습니다. 오토 클레이핑 후, 튜브 내부의 유리 암페어를 분쇄하여 배양 배지를 방출하고, 튜브를 양성 대조군으로 56 ℃에서 배양한다.

멸균이 효과가 없다면 생존 포자가 자라서 국물이 노란색으로 변합니다.
살균이 성공하면 포자가 비활성화되고 국물은 자주색으로 남아 있습니다.
오토 클레이브 유효성 검사의 주파수
현재, 자동 클레이브를 얼마나 자주 검증 해야하는지 정의하는 엄격한 규제 표준은 없습니다. 그러나 실험실은 자체 검증 일정을 수립하고 엄격하게 준수해야합니다.

작동 편의성 및 신뢰할 수있는 검증을 위해 화학 지표 테이프 및 생물학적 지표 튜브를 적극 권장합니다. 이러한 방법은 사용자 친화적이며 멸균 효과에 대한 포괄적 인 평가를 제공합니다.

오토 클레이핑에 대한 주요 고려 사항
(일부 완전 자동화 된 수입 오토 클레이브는 수동 통풍구가 필요하지 않을 수 있습니다)

오토 클레이브를 사용할 때는 증기를 도입하는 동안 챔버에서 차가운 공기를 제거하는 것이 필수적입니다. 배기구는 모든 차가운 공기가 추방 될 때까지 열려 있어야합니다.

챔버 내부에 공기가 남아 있으면 압력 게이지는 정확한 압력을 나타낼 수 있지만 실제 온도는 예상보다 낮습니다. 잔류 공기가 많을수록 불일치가 커져 불완전한 멸균이 발생합니다.

(발효 기반 매체를 멸균 할 때 작은 튜브에서 기포가 발생하는 사람들의 경우 결과를 개선하기 위해 공기 대피를 늘리십시오.)